1 海南大学农学院, 海口, 570228;
2 中国热带农业科学院热带生物技术研究所, 海口, 571101;
3 中国热带农业科学院分析测试中心, 海口, 571101
作者 通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2015 年, 第 13卷, 第 15 篇 doi: 10.13271/j.mpb.013.000808
收稿日期: 2015年03月20日 接受日期: 2015年03月28日 发表日期: 2015年04月02日
2 中国热带农业科学院热带生物技术研究所, 海口, 571101;
3 中国热带农业科学院分析测试中心, 海口, 571101
作者 通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2015 年, 第 13卷, 第 15 篇 doi: 10.13271/j.mpb.013.000808
收稿日期: 2015年03月20日 接受日期: 2015年03月28日 发表日期: 2015年04月02日
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摘 要
本研究对聚乙二醇(polyethylene glycol, PEG)的分子量、浓度及处理时间等三个影响番木瓜叶肉原生质体转化效率的主要因素进行了优化,同时利用绿色荧光蛋白(green fluorescent protein, GFP)表达体系进行了转化表达分析。结果表明:经40% PEG8000溶液处理10 min,可使GFP在原生质体中的平均转化率达到45.26%;沉默抑制载体pGreen-Hcpro和GFP瞬时表达载体共转化番木瓜叶肉原生质体,可使GFP在原生质体中的平均转化率进一步提高到68.75%,相比单独转化瞬时表达载体pRNAi-GFP增长了51.90%。PEG介导番木瓜叶肉原生质体瞬时表达体系的建立为番木瓜功能基因组和基因功能研究奠定了基础,可为热带作物的研究提供又一模式作物,推动热带作物在分子及细胞生物学领域的发展。
关键词
番木瓜;原生质体;PEG;瞬时表达